Preconditioning with L-alanyl-L-glutamine in a Mongolian Gerbil model of acute cerebral ischemia/reperfusion injury / Pré-condicionamento com L-alanil-L-glutamina em modelo de isquemia/reperfusão cerebral aguda em Gerbils da Mongólia

PURPOSE: To investigate the effect of L-alanyl-L-glutamine (L-Ala-Gln) preconditioning in an acute cerebral ischemia/reperfusion (I/R) model in gerbils. METHODS: Thirty-six Mongolian gerbils (Meriones unguiculatus), (60-100g), were randomized in 2 groups (n=18) and preconditioned with saline 2.0 ml (Group-S) or 0.75g/Kg of L-Ala-Gln, (Group-G) administered into the femoral vein 30 minutes prior to I/R. Each group was divided into three subgroups (n=6). Anesthetized animals (urethane, 1.5g/Kg, i.p.) were submitted to bilateral occlusion of common carotid arteries during 15 minutes. Samples (brain tissue and arterial blood) were collected at the end of ischemia (T0) and after 30 (T30) and 60 minutes (T60) for glucose, lactate, myeloperoxidase (MPO), thiobarbituric acid reactive substances (TBARS), glutathione (GSH) assays and histopathological evaluation. RESULTS: Glucose and lactate levels were not different in studied groups. However glycemia increased significantly in saline groups at the end of the reperfusion period. TBARS levels were significantly different, comparing treated (Group-G) and control group after 30 minutes of reperfusion (p<0.05) in cerebral tissue. Pretreatment with L-Ala-Gln promoted a significant increase in cerebral GSH contents in Group-G at T30 (p<0.001) time-point compared with Group-S. At T30 and T60, increased levels of GSH occurred in both time-points. There were no group differences regarding MPO levels. Pyknosis, presence of red neurons and intracellular edema were significantly smaller in Group-G. CONCLUSION: Preconditioning with L-Ala-Gln in gerbils submitted to cerebral ischemia/reperfusion reduces oxidative stress and degeneration of the nucleus (pyknosis) and cell death (red neurons) in the cerebral tissue.

OBJETIVO: Investigar o efeito do pré-condicionamento com L-alanil-L-glutamina (L-Ala-Gln) em gerbils submetidos à isquemia/reperfusão (I/R) cerebral aguda. MÉTODOS: Trinta e seis gerbils (Meriones unguiculatus) (60-100g) foram divididos em dois grupos (n=18) e pré-condicionados com 2,0 ml de soro fisiológico (Grupo-S) ou 0.75g/kg de L-Ala-Gln, (Grupo-G), administrados na veia femoral 30 minutos antes da I / R. Cada grupo foi dividido em três subgrupos (n=6).Animais anestesiados com uretano, 1.5g/kg, ip, foram submetidos à oclusão bilateral das artérias carótidas comuns, durante 15 minutos. Amostras (tecido cerebral e sangue arterial) foram coletadas no final da isquemia (T0) e após 30 (T30) e 60 minutos (T60) para a aferição das concentrações de glicose, lactato, mieloperoxidase (MPO), substâncias reagentes ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), glutationa (GSH) e avaliação histopatológica. RESULTADOS: As concentrações de glicose e lactato não foram diferentes nos grupos estudados; a glicemia aumentou significativamente no Grupo-S ao final da reperfusão. Concentrações de TBARS no tecido cerebral foram significativamente diferentes, comparando os Grupos G e S, no T30 (p <0,05). O pré-tratamento com L-Ala-Gln promoveu um aumento significativo de GSH cerebral no Grupo-G comparado ao Grupo-S no T30 (p <0,001). Houve aumento das concentrações de GSH no T30 e T60 no Grupo-G. Não houve diferenças quanto as concentrações de MPO. Picnose, presença de neurônios vermelhos e edema intracelular foram significativamente menores no Grupo-G. CONCLUSÃO: O pré-condicionamento com L-Ala-Gln em gerbils submetidos à isquemia/reperfusão cerebral reduz o estresse oxidativo, a degeneração nuclear (picnose) e morte celular (neurônios vermelhos) no tecido cerebral.

Pré-condicionamento com l-alanil-glutamina na lesão aguda de isquemia e reperfusão cerebral em gerbils [manuscrito] / Preconditioning with l-alanyl-glutamine in acute ischemia and cerebral reperfusion in gerbils [manuscript]

Foram investigados os efeitos da L-alanil-glutamina (L-ALN-GLN) sobre as concentrações sanguíneas e teciduais de metabólicos (lactado, piruvato, glicose e corpos cetônicos), substâncias reagentes ao ácido tiobarbitúrico (TBARS), glutationa (GSH), mieloperoxidase (MPO) e avaliação histopatológica em gerbils. Tratou-se de um estudo experimental, controlado. Utilizaram-se 54 gerbils, machos, com peso médio de 150g, distribuídos aleatoriamente em 3 grupos: salina com isquemia e reperfusão (SIR), salina sem isquemia e reperfusão (SSI), L-alanil-glutamina com isquemia e reperfusão (GIR), redistribuídos em 3 subgrupos: T0 (tempo máximo de isquemia), T30 (30 min de reperfusão) e T60 (60 min de reperfusão), com 6 animais cada. Foram pré-tratados com solução salina 2,0 mL 0,9% endovenoso (e.v.) ou L-ALN-GLN 0,75g/Kg (c.v.), 30 min antes do início dos experimentos. A isquemia cerebral foi induzida pela oclusão bilateral das artérias carótidas comuns (ACCs), por um período de 15 minutos. Após todos os procedimentos cirúrgicos as amostras (sangue e tecido) foram coletadas ao final dos três tempos. Nas comparações entre os grupos (SSI) e (SIR) houve um aumento significante nas concentrações de lactato no sangue no grupo SIR em T0 (0,756+-0,091 versus 3,596+-1,546); p = 0,00122, T30 (0,869+-0,254 versus 3,316=-1,356); p = 0,0015 e em T60 (0,858+-0,460 versus 2,409+-0,801); p = 0,0021. No tecido cerebral houve um aumento significante do lactato em T0 (1,374+-0,172 versus 2,530+-0,850); p = 0,0085, T30 (0,891+-0,697 versus 1,840+-0,530); p = 0,0243 e em T60 (1,182+-0,136 versus 1,744+-0,463); p = 0,0173 no grupo SIR...